(一)、概述
食用被微生物污染的食品而導(dǎo)致的疾病,稱作食源性疾病。導(dǎo)致這類疾病的微生物叫食源性致病菌。隨著人們居住和衛(wèi)生條件的不斷改善,以及抗生素的濫用,人類對(duì)病菌的抵抗能力卻在不斷下降,食源性疾病一直呈上升的趨勢(shì)。因此,對(duì)食品中致病菌的監(jiān)測(cè)和檢驗(yàn)也就越顯示其重要性,常規(guī)的檢驗(yàn)大多依靠培養(yǎng)目標(biāo)微生物的方法來(lái)確定食品是否受到此微生物的污染,這些方法需要一定的培養(yǎng)時(shí)間,少則2~3天,多至數(shù)周,才能確定。而現(xiàn)行有效的一些快速檢測(cè)方法不僅可以大大縮短檢測(cè)時(shí)間提高微生物檢出率并可用于微生物計(jì)數(shù)、早期診斷、鑒定等方面,以做到快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確??焖俜椒ò宋⑸飳W(xué)、分子化學(xué)、生物化學(xué)、生物物理學(xué)、免疫學(xué)和血清學(xué)等領(lǐng)域。
(二)、常見(jiàn)、常用的快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)微生物數(shù)量的方法如下:
1、活細(xì)胞計(jì)數(shù)的改進(jìn)方法
?。?)、旋轉(zhuǎn)平皿計(jì)數(shù)方法
?。?)、疏水性柵格濾膜法(HGMF)或等格法(isogrid method)
?。?)、血膜系統(tǒng)(Pertrifilm)
?。?)、酶底物技術(shù)(ColiComplete)
(5)、直接外熒光濾過(guò)技術(shù)(DEFT)
(6)、“即用膠”系統(tǒng)(SimPlate)
2、用于估計(jì)微生物數(shù)量的新方法
?。?)、阻抗法
?。?)、ATP生物發(fā)光技術(shù)
3、其他方法
?。?)、微量量熱法
?。?)、接觸酶測(cè)定儀
?。?)、放射測(cè)定法
?。ㄈ?、食品中沙門氏菌的快速篩檢方法
1、沙門氏菌顯色培養(yǎng)基法
2、免疫學(xué)方法
3、分子生物學(xué)方法
4、自動(dòng)傳導(dǎo)法
(四)、大腸桿菌O157:H7快速檢測(cè)方法
大腸桿菌O157:H7腸出血性大腸桿菌的主要血清型,自1982年在美國(guó)被分離并命名以來(lái),陸續(xù)發(fā)現(xiàn)本菌與輕度腹瀉、溶血性尿毒綜合癥、出血性腸炎、嬰兒猝死綜合癥等多種人類病癥密切相關(guān),是食源性疾病的一種重要致病菌。E.coli O157:H7屬于腸桿菌科埃希氏菌屬,為革蘭氏陰性桿菌,有鞭毛。近年來(lái)作為食品衛(wèi)生及流行病學(xué)的研究熱點(diǎn),E.coli O157:H7的分離和鑒定方法已取得了較大進(jìn)展。利用其生化特征、免疫原性建立的方法以及現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用,可以從多方面對(duì)E.coli O157:H7進(jìn)行檢測(cè)。
1、E.coli O157:H7鑒別培養(yǎng)基及顯色培養(yǎng)基
2、免疫學(xué)檢測(cè)方法
3、分子生物學(xué)方法
?。ㄎ澹⒔瘘S色葡萄球菌的快速檢測(cè)方法
金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽(yáng)性球菌,呈普通串狀排列無(wú)芽孢,無(wú)鞭毛,不能運(yùn)動(dòng)。該菌在自然界中分布廣泛,如空氣、水、土壤、飼料和一些物品上,是zui常見(jiàn)的化膿性球菌之一,食品受其污染的機(jī)會(huì)很多。金黃色葡萄球菌食物中毒是其腸毒引起的,目前已確認(rèn)的腸毒素至少有A,B,C1,C2,C3,D,E和F8個(gè)型。由金黃色葡萄球菌腸毒素引發(fā)的中毒爆發(fā)事件,近年來(lái)*2000年日本“雪印奶粉”事件,14000多人受感染。因此,金黃色葡萄球菌的檢測(cè)方法研究多集中于腸毒素的檢測(cè)方法上。
?。?、李斯特氏菌快速檢測(cè)方法
李斯特氏菌,特別是單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種人畜致病菌,可引起人和動(dòng)物腦膜炎、敗血癥及孕婦流產(chǎn)等疾病,且死亡率*,可達(dá)30%~70%。該菌在自然界中廣泛存在,肉、奶、蛋、水產(chǎn)品和蔬菜等均有不同程度的污染,該菌在4℃冰箱保存的食物中以可繁殖生長(zhǎng),使其危害性增加。zui初用于李斯特氏菌檢驗(yàn)的方法為冷增菌法,此法培養(yǎng)物在4℃培養(yǎng)30天,有時(shí)甚至長(zhǎng)達(dá)一年。現(xiàn)在采用的常規(guī)方法為常溫培養(yǎng)方法,這些方法大部分需要將樣品在增菌液中分別培養(yǎng)24h至7天,故需要7~11天才能分離鑒定出李氏菌。自1985年以來(lái)單克隆抗體、DNA探針和PCR等技術(shù)用于此菌的檢驗(yàn)上已經(jīng)取得了突破性的進(jìn)展。
?。ㄆ撸澢鷹U菌快速檢測(cè)方法
該菌的檢驗(yàn)有一定的難度,近年來(lái),對(duì)該菌的檢驗(yàn)方法研究有免疫學(xué)和分子生物學(xué)方面,主要有下面幾種:
1、酶免疫檢測(cè)方法
2、VIDAS方法
3、乳膠凝集試驗(yàn)
4、PCR方法
5、DNA探針檢測(cè)方法
(八)、致病性弧菌快速檢測(cè)方法
致病性弧菌系指能夠引起人類食物中毒或其他病癥的弧菌屬細(xì)菌,除了常見(jiàn)的霍亂弧菌和副溶血性弧菌外還包括其他10種致病性的弧菌,但至目前為止,致病性弧菌的快速檢測(cè)方法研究還大多集中于霍亂弧菌和副溶血性弧菌,且霍亂弧菌由于是一類強(qiáng)致病菌,因此,對(duì)它的研究受到一定的限制,尤其是在食品中的檢測(cè)方法研究,目前的方法研究多為臨床診斷方面,應(yīng)用于食品檢驗(yàn)中的快速方法就很有限。
?。ň牛?、其他檢驗(yàn)方法和快速鑒定方法
1、厭氧菌檢測(cè)裝置
2、微生物快速鑒定系統(tǒng)